体外定向诱导人羊膜间充质干细胞向骨、软骨及脂肪细胞的分化

摘要

背景:人羊膜间充质干细胞属于成体干细胞,在体外不同条件下诱导分化为骨、软骨及其他结缔组织,较其他类型间充质干细胞,因其来源广泛,分离无创伤,较低的免疫原性、生长周期短等特点,是组织工程种子细胞的重要来源.目的:探讨人羊膜间充质干细胞是否具有间充质干细胞特性及诱导成骨、软骨及脂肪细胞诱导分化的能力.方法:取足月产胎盘羊膜组织,酶消化法分离人羊膜间充质干细胞,取第3代细胞分别加入成骨、成软骨及成脂诱导液的培养基进行诱导.结果与结论:①茜素红染色显示,成骨诱导后细胞存在多个矿化结节,细胞中碱性磷酸酶活性明显增加;②甲苯胺蓝染色显示,成软骨诱导后细胞基质中分泌大量的糖胺聚糖;③油红O染色显示,成脂诱导后,细胞浆内可见脂滴;④实时荧光PCR结果显示,成骨、成软骨及成脂诱导21 d后,相关基因表达较7d时明显增高;⑤结果人羊膜间充质干细胞具有向成骨细胞,软骨细胞及脂肪细胞的潜能,可选作为组织工程学的种子细胞.