神经干细胞移植治疗APP-PS1转基因阿尔茨海默病小鼠的~1H-MR波谱研究

摘要

目的探讨~1H-MRS评价神经干细胞（NSCs）移植治疗APP-PS1转基因阿尔茨海默病（AD）小鼠疗效的应厂用价值。方法 C57BL/6小鼠NSCs培养、扩增。12月龄的APP-PS1转基因AD小鼠30只随机数字表法等分为A、B 2组,分别移植NSCs及磷酸盐缓冲液（PBS）至双侧海马CA1式;正常小鼠15只（野生型）作为对照组（C组）不作处理。应用7.0 T高场强MR仪分别在移植前及移植后6周行~1H-MRS,测量海马区N-乙酰天冬氨酸（NAA）、谷氨酸（Glu）、肌醇（mI）、胆碱（Cho）及肌酸（Cr）的峰下面积,分析NAA/Cr、Glu/Cr、mI/Cr及Cho/Cr的变化并与Nissl染色与电镜检查结果进行对照研究。组间各指标的比较采用单因素方差分析。结果 C57BL/6小鼠NSCs培养成功。~1H-MRS显示移植前A、B、C 3组的NAA/Cr、Clu/Cr及mI/Cr分别为0.89±0.05、0.88±0.04、1.15±0.05,0.40±0.03、0.39±0.03、0.45±0.05,0.67±0.05、0.67±0.05、0.52±0.04,差异有统计学意义（F值分别为148.91 8、7.529、59.468,P值均＜0.01）。其中A、B 2组AD小鼠的NAA/Cr、Glu/Cr及mI/Cr值差异无统计学意义（t值分别为0.147、0.006、0.207,P值均＞0.05）,但均较C组差异有统计学意义（t值分别为0.255、0.467、0.171及0.269、0.527、0.151,P值均＜0.05）,移植6周后A、B、C3组的NAA/Cr、Glu/Cr及ml/C1分别为1.13 4-0.07、0.86±0.05、1.14±0.05,0.45±0.04、0.38±0.02、0.44±0.03,0.58±0.04、0.67±0.04、0.53±0.04,差异有统计学意义（F值分别为112.092、23.076、44.367,P值均＜0.01）。其中A组NAA/Cr及Glu/Cr值升高,mI/Cr值降低,较R组差异均有统计学意义（t值分别为0.271、0.071、0.089,P值均＜0.05）,与C组相比NAA/Cr及Glu/Cr值差异无统计学意义（t值分别为0.013、0.012,P值均＞0.05）,但mI/Cr值差异有统计学意义（t=0.046,P＜0.05）。各组小鼠Cho/Cr值在移植前后差异均无统计学意义（P值均＞0.05）。Nissl染色显示AD小鼠在NSCs移植后海马区神经元细胞数较未移植AD小鼠明显增多。电镜显示A组小鼠海马CA1区大部分神经元细胞形态正常,细胞器丰富,而B组AD小鼠神经元细胞明显肿胀,突触联系疏松。结论 ~1H-MRS可定量显示APP-PS1转基因AD小鼠NSCs移植前后的脑内代谢变化,对无创性评价NSCs治疗AD的效果具有较大的应用价值。