猪囊尾蚴小热休克蛋白的免疫原性研究

摘要

利用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),从猪囊尾蚴虫体中扩增出小热休克蛋白(small Heatshock protein,sHSP)基因,克隆至原核表达载体pGEX-4T-1,在大肠杆菌BL21中以GST融合蛋白的形式表达.SDS-PAGE分析证明,表达产物为64 Ku的融合蛋白,经凝胶扫描分析,表达量约占菌体可溶性蛋白的30%.免疫学分析(Western blot,ELISA)结果表明,sHSP能与猪囊尾蚴血清反应.将表达产物点电泳后切胶回收免疫小鼠,进行Western blot和ELISA检测,其抗血清能与猪囊虫粗抗原及纯化的sHSP重组融合蛋白产物发生免疫学反应.该研究为丰富新的诊断试剂和免疫用重组抗原具有重要意义,同时,预测糖基化、磷酸化作用在sHSP实现生物学功能方面也具有广泛的意义.