小分子干扰RNA对卵巢癌紫杉醇耐药株的多药耐药性逆转的研究

摘要

目的 探讨小分子干扰RNA(small interfering RNAs,siRNA)对A2780/Taxol细胞多药耐药性的逆转作用.方法 2005-07-2005-12华中科技大学同济医学院附属协和医院根据多药耐药基因1(MDR1)序列设计2条siRNA,将siRNA包装入质粒,经转化、克隆、扩增、纯化,与pEGFPN-1质粒一起共转染A2780/Taxol细胞,流式细胞仪、MTT、RT-PCR和Western blot分别检测转染效率、紫杉醇的半数抑制浓度(IC50)、细胞P-gp蛋白及MDR1 mRNA表达.结果 两种重组质粒与EGFP质粒转染效率无明显差异,P-gp表达水平明显下调.两条siRNA对紫杉醇敏感性的相对逆转率分别达63.8%及51.2%.MDR1基因不同程度的沉默,MDR-A能更有效封闭MDR1基因,MDR1 mRNA相对水平下降(67.3±0.8)%.结论 siRNA能有效逆转MDR1基因编码P-gp介导的A2780/Taxol细胞多药耐药.