HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中黑骨藤的3个指标成分及其药动学研究

摘要

目的:建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定大鼠灌胃黑骨藤提取物后血浆中活性成分3-O-咖啡酰基奎宁酸、4-O-咖啡酰基奎宁酸和5-O-咖啡酰基奎宁酸的分析方法,并用该方法研究3-O-咖啡酰基奎宁酸等3个指标成分的药动学特征.方法:血浆样品处理选择酸化后甲醇沉淀蛋白,ACE C18-PFP(150 mm×4.6 mm,3μm),流速:0.6 mL· min-1,柱温:40℃,进样器温度:15℃,流动相:0.1％甲酸乙腈(B)-0.1％甲酸水(A)梯度洗脱,进样体积:1 μL,采用电喷雾电离源(ESI-),扫描方式为选择二级离子监测.结果:3个指标成分分别在1.09～1 114.00,1.00～1 086.00,0.98～1 024.00 ng· mL-呈良好线性关系,提取回收率、精密度、准确度和稳定性均良好达到测定要求.3-O-咖啡酰基奎宁酸、4-O-咖啡酰基奎宁酸和5-O-咖啡酰基奎宁酸3个指标成分的Tmax分别为(1.22±0.55),(0.93±0.45)和(0.81 ±0.56)h,Cmax分别为(151.01±28.75),(83.84±14.71和(78.686±3.27) ng·mL-1.结论:建立的HPLC-MS/MS检测方法具有特异、快速、准确和灵敏的特点,能够同时测定生物样品中3-O-咖啡酰基奎宁酸等3个指标成分的血药浓度,并成功应用于黑骨藤在正常大鼠体内这3个指标成分的药动学研究.