白念珠菌MP65和SAP2蛋白原核表达质粒的构建与表达

摘要

目的 构建以白念珠菌基因MP65和SAP2为目的 基因的原核表达质粒,IPTG诱导其表达融合蛋白,并对其免疫原性进行分析.方法 PCR法自白念珠菌标准菌株获取MP65和SAP2基因,分别插入至原核表达载体pGEX-4T-2和pET32a中;将重组表达质粒转染感受态E.coli BL-21,经IFTG诱导表达、纯化后,SDS-PAGE和Western blot分析.结果 PCR法克隆出全长为1140 bp的MP65和1197 bp的SAP2基因,构建的原核表达质粒pGEX-4T-2-MP65及pET32a-SAP2,可分别表达出66 KD左右的GST融合蛋白和His融合蛋白.结论 成功获取了白念珠菌基因MP65和SAP2,所构建的原核表达质粒在BL-21中成功表达;两种蛋白均有免疫原性.