GRIN2B启动子区多态性与散发性阿尔茨海默病关系的功能学分析

摘要

目的 探讨N-甲基-D-天冬氨酸受体2B(N-methyl-D-aspartate receptor 2B,NR2B)基因GRIN2B启动子区多态性对其转录活性的影响,从功能学方面阐述GRIN2B与散发性阿尔茨海默病(sporadic Alzheimer's disease,SAD)的关系.方法 选取双荧光报告基因系统(pGL3-Basic及pRL-TK)为报告基因载体,用基因重组和定点突变技术构建含不同基因型的GRIN2B启动子报告基因质粒,转染人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞和人宫颈癌上皮(HeLa)细胞,计算不同环境下各启动子的相对荧光素酶活性(relative luciferase activity,RLA).结果 在细胞未处理情况下,pGL-TCTG和pGL-GACA两者的RLA没有差异(SH-SY5Y细胞中P=0.149;HeLa细胞中P=0.288),而pGL-TATG的转录活性与pGL-TCTG相比有显著性差异,转录活性约增加1.5-1.7倍(SH-SY5Y细胞中P=0.000;HeLa 细胞中P=0.000);所检测的三种GRIN2B启动子质粒在血清剥夺、Na2S2O4、H2O2及Aβ25-35干预下的RLA与非处理组相比均无显著性差异(P＞0.05).结论 -421C/A碱基的改变,可引起GRIN2B启动子启动活性的改变,-421C型质粒下调了GRIN2B启动子的转录活性.