miR-200c抑制自噬对肝癌耐药细胞HepG2/ADM化疗敏感性的影响

摘要

目的:观察微小RNA-200c(miR-200c)调节自噬对肝癌耐药细胞HepG2/ADM化疗敏感性的影响.方法:肝癌及肝癌耐药细胞分为4组,即HepG2组、HepG2/ADM组、阴性转染对照组和miR-200c类似物转染组,HepG2组和HepG2/ADM组不进行质粒转染,阴性转染对照组HepG2/ADM细胞转染阴性对照质粒miRNA-pEZ-M02-UBQLNl,miR-200c类似物转染组HepG2/ADM细胞转染miR-200c mimics-pEZ-M02-UBQLNl质粒.荧光定量PCR检测各组细胞miR-200c基因的表达,MTT检测各组细胞增殖情况,透射电子显微镜检测各组细胞自噬体,Western Blot检测自噬相关蛋白Beclin-1和LC3-II的表达.结果:HepG2/ADM组细胞miR-200c相对表达量显著低于HepG2组(P ＜ 0.01),miR-200c类似物转染组miR-200c相对表达量显著高于HepG2/ADM组(P＜0.01).多柔比星对miR-200c类似物转染组细胞IC50值显著低于HepG2/ADM组(P＜0.01).HepG2/ADM组细胞高倍视野下自噬体显著多于HepG2组(P ＜ 0.01),miR-200c类似物转染组细胞自噬体显著少于HepG2/ADM组(P ＜ 0.01).HepG2/ADM组细胞Beclin-1和LC3-II蛋白相对表达量显著高于HepG2组(P ＜0.01),miR-200c类似物转染组Beclin-1和LC3-II蛋白相对表达量显著低于HepG2/ADM组(P＜0.01).结论:上调miR-200c表达可以抑制HepG2/ADM细胞自噬,增加HepG2/ADM细胞对化疗药物的敏感性.