转化生长因子β1和丝裂原活化激酶通路调控人肺成纤维细胞表型

摘要

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人肺成纤维细胞表型分化中的作用.方法以人肺成纤维细胞HLF-02细胞系为研究对象,给予10 ng/ml TGF-β1刺激不同时间;阻断实验以SB203580、PD98059分别阻断p38通路和细胞外调控激酶(Erk)通路;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内表型分化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达;运用Western印迹检测细胞内p38、Erk、c-jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化以及α-SMA蛋白表达的强度.结果(1)TGF-β1刺激HLF-02细胞24h组、48 h组、72 h组的α-SMA mRNA表达水平分别为:1.87±0.11、2.49±0.10、3.02±0.15;α-SMA蛋白表达水平分别为:3.20±0.14、3.96±0.21、4.57±0.13.(2)TGF-β1可以激活HLF-02细胞内p38和Erk通路,对JNK没有活化作用.(3)SB203580、PD98059各自抑制了TGF-β1诱导的p38、Erk激酶的磷酸化.(4)SB203580抑制了TGF-β1诱导的α-SMAmRNA和蛋白表达(抑制率分别为30%和40%);PD98059同样抑制了TGF-β1诱导的α-SMA mRNA和蛋白表达(抑制率分别为10%和20%).结论TGF-β1可诱导HLF-02细胞表型的分化,p38、Erk激酶参与了调控TGF-β1的促表型分化作用.