人胚胎干细胞的培养条件与鉴别的方法学研究

摘要

目的:研究人胚肺成纤维细胞(human Embryonic Lung Fibroblast,HELF)饲养层对人胚胎干细胞(Human Embryonic Stem Cells,hES细胞)生长的作用,摸索适宜的hES细胞培养与识别方法.方法:以流产胎儿肺组织制备HELF饲养层,取生殖嵴或背肠系膜及其周围组织,获得由人原始生殖细胞(human Primordial Germ Cells,hPGCs)转化成的hES细胞.比较其在不同条件下的增殖行为,并通过生物学特性鉴别该细胞系.结果:HELF饲养层在LIF存在的条件下有利于支持hES细胞的体外生长;hES细胞碱性磷酸酶组织化学染色及端粒酶ELISA检测阳性;具有正常的核型;在体外发展为类胚体.结论:HELF饲养层和LIF的协同作用能支持hES细胞的生长;建立通过生物学特性鉴别hES细胞的方法.