STAT3siRNA对肺腺癌A549细胞STAT3表达和细胞生物学行为的影响

摘要

目的:观察经RNA干扰沉默STAT3基因对人肺腺癌细胞A549生长和凋亡的影响.方法:设计并经化学合成了针对STAT3基因不同位点的3条小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)序列(STAT3siRNA1、STAT3siRNA2、STAT3siRNA3),在脂质体(LipofectamineTM2000)介导下转染人肺腺癌细胞株A549,采用RT-PCR法检测STAT3 mRNA表达变化,筛选出抑制作用最强的STAT3-siRNA.免疫印迹法检测细胞STAT3、Cyclin D1、BAX、Bcl-2、Caspase-9蛋白表达.AM-BLUE法测定A549细胞体外增殖情况.流式细胞仪检测细胞凋亡.结果:经RNA干扰能有效降低A549细胞STAT3mRNA表达水平(P<0.05),转染STAT3siRNA后,A549细胞STAT3、Cyclin D1、Bcl-2蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05),而BAX、Caspase-9蛋白的表达水平升高(P<0.05).STAT3蛋白表达分别与CyclinD1、Bcl-2蛋白表达呈正相关(r=0.854,0.910,P<0.05);与BAX蛋白表达呈负相关性(r=-0.848,P<0.05);与Caspase-9蛋白表达呈无相关性(r=-0.787,P>0.05).RNA干扰法沉默STAT3基因表达后,A549细胞增殖受到明显抑制,细胞凋亡率明显增加.结论:STAT3 siRNA可有效抑制A549细胞STAT3表达,抑制A549细胞生长并促进其凋亡.