STAT3 siRNA对肺腺癌A549细胞STAT3及其下游基因表达的影响

摘要

目的:观察RNA干扰沉默STAT3基因对人肺腺癌A549细胞STAT3、CyclinD1、Bcl-2、BAX、Caspase-9蛋白表达的影响及其相关性及对细胞生长的影响,探讨肺癌基因治疗的新途径.方法:采用化学合成法,合成针对STAT3基因不同位点设计的3条小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)序列(siRNA1-3)和1条带有荧光标记的应用STAT3-siRNA转染处理人肺腺癌细胞系A549,转染16h后荧光显微镜观察转染效率,RT-PCR检测STAT3基因表达的变化,蛋白免疫印迹法检测转染后A549细胞STAT3,CyclinD1,BAX,Bcl-2,Caspase-9蛋白表达,AM-BLUE检测A549细胞生长情况.结果:经RNA干扰能有效减低A549细胞STAT3 mRNA表达水平(P<0.05),转染后A549细胞STAT3、CyclinD1、Bcl-2蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05),而BAX、Caspase-9蛋白的表达水平升高(P<0.05).STAT3蛋白表达分别与CyclinD1、Bcl-2蛋白表达呈正相关(r=0.854,0.910,P<0.05);与BAX蛋白表达程负相关性(r=-0.848,P<0.05);与Caspase-9蛋白表达程无相关性(r=-0.787,P>0.05).RNA干扰法沉默STAT3基因后,A549细胞增殖受到明显抑制.结论:STAT3-siRNA可有效抑制STAT3、CyclinD1、Bcl-2在人肺腺癌A549细胞中的表达,升高BAX、Caspase-9在人肺腺癌A549细胞中的表达,抑制A549细胞生长.