前列腺癌特异突变DNA聚合酶β表达载体转染NIH3T3的细胞生物学行为变化

摘要

目的 观察前列腺癌(CPa)特异突变DNA聚合酶β(polβ) 表达载体转染NIH3T3的细胞生物学行为变化.方法 采用业已成功构建的2例特异突变polβ表达载体(pCDNA3.1-M1和pCDNA3.1-M2),采用脂质体包裹转染NIH3T3细胞,观察比较这些突变对细胞polβ基因mRNA和蛋白表达的影响以及引发的相应的细胞周期和细胞自发突变率等细胞生物学行为的变化.结果 筛选得到高表达PCa特异突变polβ的NIH3T3细胞株(NIH3T3-M1,NIH3T3-M2)和高表达野生型polβ的NIH3T3细胞株(NIH3T3-W).RT-PCR和Western 印迹结果显示,外源DNA polβ在转化的NIH3T3细胞中呈现高表达.与转染空载体和未转染的NIH3T3细胞相比,转染PCa特异突变polβ的2个细胞株和转染野生型polβ的细胞株的细胞周期的S期比例及转染细胞的HGPRT(次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶)基因的自发突变率均显著增加,且转染野生型polβ的细胞株亦显著高于转染PCa特异突变DNA polβ的细胞株. 结论 DNA polβ高表达介导了肿瘤发生的分子机制.