应用低浓度长春新碱分离并鉴定MG-63细胞系中的骨肉瘤干细胞

摘要

目的 分离并鉴定人成骨肉瘤细胞系MG-63中的骨肉瘤类肿瘤干细胞.方法 通过无血清培养基加入低浓度长春新碱的方法悬浮培养成骨肉瘤细胞球来进行分离和类干细胞富集.后行细胞形态学观察、细胞球免疫荧光染色、RT-PCR、流式细胞仪鉴定细胞表面标志物,成骨、成脂肪诱导及裸鼠成瘤的一系列鉴定试验.结果 悬浮培养得到肉瘤细胞球,可持续传代细胞亚系"MG-63-M",多能干细胞、胚胎干细胞标志物及多药耐药基因表达均为阳性.具有很强的自我更新及多项分化能力.结论 MG-63细胞系中存在具有自我更新及多向分化能力的骨肉瘤干细胞,而采用神经干细胞培养基中添加低浓度长春新碱是从骨肉瘤细胞系中分离培养出骨肉瘤干细胞的有效办法.