XPO1抑制剂KPT-330对人胰腺癌细胞株MIA PaCa-2增殖和凋亡的影响

摘要

背景:XPO1(exportin 1)是核质转运的重要介质之一,在多种人类恶性肿瘤中表达增高,参与肿瘤发生、发展进程,是恶性肿瘤的潜在治疗靶点.目的:探讨XPO1在人胰腺癌细胞中的表达、定位以及XP01抑制剂K1yr-330对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响.方法:以蛋白质印迹法检测6株人胰腺癌细胞株和2株人永生化正常胰腺导管上皮细胞株中的XPO1表达,选择XP01表达量最高的人胰腺癌细胞株MIA PaCa-2进行后续实验.予MIA PaCa-2细胞不同浓度KPT-330(0.03、0.3、3μmol/L)或DMSO处理,免疫荧光实验检测XPO1在细胞中的分布,CCK-8实验和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞分析检测细胞周期和细胞凋亡,蛋白质印迹法检测XPO1和凋亡相关蛋白caspase-3、PARP表达变化.结果:XP01主要聚集分布于MIA PaCa-2细胞的核膜,经KPT-330处理后,XPO1的核膜高聚现象消失.与DMSO组相比,KPT-330可抑制MIA PaCa-2细胞的XPO1表达,并能抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,作用呈浓度依赖性.机制研究显示KPT-330可诱导MIA PaCa-2细胞发生细胞周期S期阻滞,上调cleaved-caspase-3、cleaved-PARP表达.结论:XPO1抑制剂KPT-330可能通过调节细胞周期分布、诱导细胞凋亡而抑制人胰腺癌细胞增殖.