下调间隙连接蛋白43表达促进人胰腺癌细胞的侵袭和血管形成

摘要

背景:细胞间缝隙连接由间隙连接蛋白(Cx)构成,在肿瘤侵袭和血管形成过程中起重要作用.目的:以RNA干扰技术下调人胰腺癌细胞Cx43表达,观察Cx43表达改变对胰腺癌细胞缝隙连接的影响,探讨其在胰腺癌细胞侵袭和血管形成中的作用.方法:设计靶向Cx43的小干扰RNA(siRNA)并转染人胰腺癌细胞株BxPC3,以实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法检测Cx43 siRNA的干扰效果.染料传递实验检测细胞间缝隙连接,体外血管形成实验检测与BxPC3细胞共培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的血管生成能力,体外侵袭实验检测BxPC3细胞的侵袭能力.结果:Cx43 siRNA转染BxPC3细胞后,细胞Cx43 mRNA和蛋白表达明显下调.Cx43表达下调后,BxPC3细胞间、BxPC3细胞与HUVEC间缝隙连接显著减少;与BxPC3细胞共培养的HUVEC血管生成增多,每视野血管节点数显著高于对照组(15.69±1.09对5.24±1.32, P<0.05);BxPC3细胞的侵袭能力亦明显增强,每视野侵袭细胞数显著多于对照组(76.0±3.0对48.0±2.0, P<0.05).结论:下调Cx43表达可能通过减少细胞间缝隙连接,促进人胰腺癌细胞的侵袭和血管形成.