原发性肝细胞癌中p16基因甲基化及其蛋白表达分析

摘要

目的探讨p16基因的甲基化改变和p16蛋白表达在肝癌的发生发展过程中的作用.材料和方法收集原发性肝细胞癌(HCC)手术切除的新鲜标本10例,石蜡包埋标本33例,Ⅰ级8例,Ⅱ级21例,Ⅲ级14例(Edmonson分级),p16蛋白检测用免疫组化法(ABC),p16基因甲基化检测用甲基化特异PCR(MS-PCR)法.结果HCC p16蛋白缺失率65.1%(28/43),而癌旁组织缺失率11.5%(3/26),两者相比有显著差异(P＜0.01).Ⅰ～Ⅱ级HCC p16蛋白的缺失率与Ⅲ级相比明显较低(P＜0.05).p16蛋白阳性的15例HCC标本,均未检出基因甲基化,p16蛋白缺失的28例标本,有19例检出基因甲基化,甲基化率44.2%.10例癌旁肝组织有1例基因甲基化,HCC和癌旁组织相比甲基化率有明显差异(P＜0.05),基因甲基化与p16蛋白缺失明显相关(P＜0.01).各级HCCp16基因启动子区甲基化率有明显差异(P＜0.05).结论p16蛋白缺失与HCC的发生有密切关系,低分化的HCC和p16蛋白缺失有关,p16蛋白在判断其恶性程度方面有一定的价值.基因的甲基化可能是p16基因在HCC中的主要失活方式,HCC分化程度和p16基因甲基化之间有密切关系.