过表达乳腺癌转染抑制基因1提高骨肉瘤细胞对紫杉醇敏感性的研究

摘要

目的 探讨过表达乳腺癌转染抑制基因1（BRMS1）对骨肉瘤紫杉醇敏感性的影响机制。方法 将人骨肉瘤MG-63细胞分为空白组、pcDNA3.1-BRMS1组、紫杉醇组和pcDNA3.1-BRMS1＋紫杉醇组,其中空质粒pcDNA3.1（＋）和重组质粒pcDNA3.1（＋）-BRMS1转染参照Lipofectamine?2000转染说明。蛋白质印迹法（Western blot）检测BRMS1、核因子-κB（NF-κB）p65、增殖细胞核抗原（PCNA）和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白（bax）蛋白表达；噻唑蓝（MTT）法、膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）/碘化丙锭（PI）双染法分别检测细胞活力和凋亡率。应用SPSS 21.0统计软件分析,计量资料以均值±标准差（Mean±SD）表示,组间比较采用t检验。结果 pcDNA3.1-BRMS1转染后MG-63细胞BRMS1蛋白表达（0.216±0.018）明显升高,与空白组（0.018±0.004）比较差异有统计学意义（t＝33.956,P＆0.05）。与空白组比较,pcDNA3.1-BRMS1组和紫杉醇组细胞活力（0.603±0.051、0.536±0.04）明显降低（t＝8.311 、11.914,P＆0.05）,凋亡率[（17.18±0.89）%、（20.02±1.07）%]明显升高（t＝48.437、48.924,P＆0.05）,NF-κBp65表达（0.307±0.029、0.257±0.026）明显降低（t＝16.580、19.403,P＆0.05）,PCNA表达（0.222±0.021、0.167±0.016）明显降低（t＝7.121、12.203,P＆0.05）,bax表达（0.091±0.012、0.131±0.013）明显升高（t＝14.352、22.476,P＆0.05）。联合使用pcDNA3.1-BRMS1和紫杉醇对细胞活力、凋亡及NF-κBp65、PCNA和bax蛋白表达影响强于单独使用。结论 过表达BRMS1可抑制骨肉瘤细胞活力,诱导细胞凋亡,增强紫杉醇敏感性,机制与抑制NF-κB信号通路有关。