SARS冠状病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要

目的制备SARS冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白特异性单克隆抗体(McAb),为SARS的快速诊断及致病机制的研究提供实验材料.方法用纯化的重组SARS-CoV N蛋白免疫BALB/c小鼠,经细胞融合和亚克隆后获得分泌针对N蛋白的杂交瘤细胞株,用Western blot和间接免疫荧光法检测这些细胞株分泌的单克隆抗体特异性,并将N蛋白分3段表达初步定位单克隆抗体识别表位所在区域.结果通过细胞融合和3轮克隆化,筛选出分泌抗N蛋白的6个杂交瘤细胞株.Western blot及免疫荧光显示,获得的McAb可与SARS-CoV N蛋白及SARS-CoV发生特异性反应,有4个细胞株分泌的抗体的识别位点位于N蛋白N端,2个位于C端.结论获得了SARS-CoV特异性单克隆抗体并进行了初步定位,可用于SARS的早期诊断及致病机制研究.