小鼠肝炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要

目的：制备并鉴定小鼠肝炎病毒(MHV)N蛋白的单克隆抗体(mAb)。方法：以Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达的重组N蛋白为免疫原，免疫BALB/c小鼠，应用常规杂交瘤技术将免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤进行融合，用间接ELISA方法筛选分泌N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系。并用Western-blot和IFA方法对所获得的单克隆抗体进行鉴定。结果：共获得4株稳定分泌抗N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系，其亚类鉴定2株为IgG2a，1株为IgG2b，1株为IgG1,轻链均为k型。经鉴定4株单克隆抗体均能与重组N蛋白发生特异性反应。结论：成功获得了特异性抗MHV N蛋白的单克隆抗体，为进一步研究N蛋白的结构功能及建立诊断学方法奠定了基础。