血液病毒核酸筛查系统室内质控方法的建立及评价

摘要

目的 建立并评价血液病毒核酸检测系统的室内质控方法.方法 将浓度为200 IU/mL的HBV DNA、2000IU/mL的HCV RNA及2 000 IU/mL的HIV RNA质控标准品用已知阴性献血者血浆标本作不同倍数稀释,直至接近检测下限,确定合适质控品浓度后与献血者标本一同进行核酸提取、扩增,连续检测20次,用即刻法分析所得核酸扩增循环阈值(Ct值)结果,计算Ct值的均值((x))、标准差(s)和变异常数(CV),以(x)±2s为警告限,超过(x)±3s为失控限,以此分别建立核酸筛查室内质控图框架并分析室内质控结果.绘制Levey-Jennings质控图,统计180次室内质控结果,结合Westgard多规则质控方法,评价该室内质控模式的可行性和有效性.结果 以HBV DNA为例,室内质控品浓度与Ct值的相关系数r=-0.920,在0.05水平达到高度相关.选择浓度100 IU/mL的HBV DNA室内质控品,连续测定20次的Ct值(x)为31.76,s为1.10,CV为3.46％.连续检测180次室内质控品Ct值的(x)为32.02,s为1.13,CV为3.53％.结论 Ct值可以作为室内质控的依据.本实验室选择的弱阳性质控品能增强当次实验结果的可靠性,可以排除因人员更换等实验条件的差异而导致的误差,可用于日常监控核酸提取扩增检测的有效性.