FoxM1促进ABCA8表达参与骨肉瘤对顺铂化疗的耐药性

摘要

目的 探讨FoxM1是否通过ABCA8参与骨肉瘤细胞对顺铂化疗的耐药.方法 在骨肉瘤顺铂耐药细胞MG63、运用慢病毒转染FoxM1建立稳定过表达细胞株MG63/LV-FoxM1及空载体对照MG63/LV-NC中,采用qRT-PCR和Western blot法检测mRNA及蛋白表达;细胞增殖实验检测FoxM1抑制剂Thiostrepton处理及shRNA敲低ABCA8后对骨肉瘤细胞顺铂敏感性的影响;应用染色质免疫共沉淀法进一步分析FoxM1与ABCA8启动子区域的结合关系.结果 骨肉瘤顺铂耐药细胞MG63/R中FoxM1和ABCA8 mRNA和蛋白表达均比亲本细胞明显升高.FoxM1过表达细胞MG63/LV-FoxM1中ABCA8的mRNA和蛋白表达与对照组相比,其表达量明显升高;采用4 μmol/L的FoxM1抑制剂经Thiostrepton处理,ABCA8的mRNA和蛋白表达明显下降.采用shRNA敲低ABCA8经Thiostrepton处理,骨肉瘤耐药细胞对顺铂的敏感性提高.染色质免疫共沉淀法结果发现FoxM1与ABCA8启动子-1383～-1373区域上的序列TCTTTTTTATA特异性结合.结论 FoxM1可能通过与ABCA8启动子结合上调其表达,促进骨肉瘤细胞对顺铂耐药,有望为临床逆转骨肉瘤化疗耐药提供新的治疗靶点.