转染Smad7基因的大鼠肾系膜细胞MMP-2、uPA及Col Ⅳ表达的改变

摘要

目的通过大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cell, MsC)转染Smad7基因,观察转基因MsC MMP-2、uPA和Col Ⅳ表达的改变,以阐明Smad7在肾小球硬化发生中的作用及其机制.方法经脂质体介导将含有Smad7重组表达质粒转染大鼠MsC,用G418筛选及Western blot、RT-PCR法鉴定;采用Western blot、酶谱分析和RT-PCR法,检测转染阳性MsC克隆MMP-2、uPA和Col Ⅳ表达改变.结果成功建立高表达Smad7的阳性MsC克隆(S-22,S-26),并证实其MMP-2蛋白分泌和酶活性明显增加,以及uPA mRNA及其蛋白的表达明显增强,并伴有MsC Col Ⅳ合成的显著下降.结论 Smad7可能通过增强MsC MMP-2、uPA酶的生成和减少Col Ⅳ的合成的机制对肾小球硬化起抑制作用.