IL-1受体拮抗物基因克隆对 人食管癌细胞株生长的影响

摘要

目的:构建白细胞介素1受体拮抗物interleukin1receptorantagonistIL1RA基因的真核表达载体,并转染人食管癌细胞株,以探讨IL1RA与食管癌发生的关系。方法:利用PCR方法从正常食管组织cDNA中扩增IL1RA,将IL1RA重组到真核表达载体pcDNA3.1中,构建IL1RA的真核表达载体pcDNA3.1IL1RA。然后将重组子导入人食管癌细胞株EC9706中,用RTPCR及Southern杂交的方法,筛选鉴定转染细胞,获得阳性克隆。并采用细胞计数法和流式细胞术(FCM)分析IL1RA对EC9706细胞生长的影响。结果:RTPCR及Southern杂交结果显示转染后的细胞克隆均呈现IL1RA高表达,与对照组EC9706细胞和带有pcDNA3.1空载体的细胞相比,转染有pcDNA3.1IL1RA的EC9706细胞由于IL1RA的表达,细胞增殖速度有不同程度的下降;FCM结果显示IL1RA不能诱导EC9706细胞的凋亡,对细胞生长的影响亦呈现不一致性。结论:提示IL1RA对食管癌的发生可能只起辅助作用。