小鼠内皮抑素基因的克隆、表达及其抑瘤效应研究

摘要

目的：克隆小鼠内皮抑素（endostatin）基因，检测其表达蛋白的生物学活性，应用该蛋白治疗大鼠C6脑胶质瘤。方法：采用RT-PCR法，从小鼠肝组织克隆endostatin基因，重组人pUC19，测序后构建非融合表达载体pBV220-endostatin，使其在DH5α内经温度诱导表达，纯化endostatin蛋白并用鸡胚绒毛膜尿囊膜实验和内皮细胞抑制实验检测其活性，经荷C6胶质瘤大鼠皮下注射该蛋白，检测其抑瘤效应。结果：所获得的endostain基因测序正确，其诱导表达蛋白分子量为20kDa，具有抗血管生成活性；应用该蛋白可抑制荷瘤大鼠C6脑胶质瘤生长。结论：小鼠endostatin基因的成功克隆、表达及应用，为抗血管生成治疗实体瘤研究奠定了实验基础。