在大肠杆菌中高效表达重组Protein A

摘要

本文构建了高效表达质粒pPA-3,其在大肠杆菌中表达的重组Protein A仅含天然Protein A的免疫球蛋白Fc段结合区,表达量达菌体可溶蛋白的20%。SDS-PAGE及Westernblot结果显示,重组Protein A的分子量有4种,即33、32.2、29.5和28.6kDa,其中33kDa与理论计算结果一致,推测其它分子量可能是由于胞内蛋白酶降解所致。一步亲和层析即可将重组Protein A从细胞裂解上清液中纯化出来。火箭电泳及酶联免疫分析结果表明,等蛋白量的该重组Protein A比天然Protein A能结合更多的免疫球蛋白。