酿酒酵母产苹果酸的还原TCA路径构建及发酵调控

摘要

苹果酸广泛应用于食品、化工行业.文中通过在酿酒酵母内敲除丙酮酸脱羧酶PDC1,并通过构建胞质内还原TCA的路径,即超表达丙酮酸羧化酶和苹果酸脱氢酶,成功地实现了苹果酸的生产.在野生型菌株中基本检测不到苹果酸的生成,而在工程菌株,苹果酸发酵浓度达到了45 mmol/L,同时副产物乙醇的产量也降低了18％.进一步通过发酵调控提高第二信使Ca2+的浓度使苹果酸的产量提高了7％,在此基础上提高丙酮酸羧化酶的辅酶生物素浓度,使苹果酸的产量达到52.5 mmol/L,较原始菌株提高了16％.