一氧化氮促进体外培养大鼠脑室下区神经干细胞的分化

摘要

目的:探讨一氧化氮(NO)对新生大鼠体外培养的神经干细胞(NSCs)分化的作用.方法:采用常规方法分离新生大鼠脑室下区(SVZ)组织,进行NSCs体外培养.用DETA/NO作为NO供体,用LNAME作为一氧化氮合酶(NOS)抑制剂.免疫荧光法检测NSCs标志物-巢蛋白(nestin)、神经元标志物-βⅢ型微管蛋白(Tuj-1)和星型胶质细胞标志物-胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,还检测了神经元型NOS的表达.用Greiss还原法检测培养液中总NO的浓度.结果:培养的神经球均为nestin阳性、BrdU阳性和nNOS阳性.NSCs和40μmol/L、50μmol/L、60μmol/LDETA/NO共培养5 d,实验组培养液中NO浓度较对照组显著增高(P＜0.01),相应实验组分化的神经元数和星型胶质细胞数较对照组明显增加(P＜0.01和P＜0.05).NSCs和100μmol/L、150μmol/L、200μmol/L L NAME共培养5 d,实验组培养液中NO浓度较对照组降低(P＜0.05),相应实验组分化的神经元数和星型胶质细胞数也较对照组减少(P＜0.05).结论:NO能直接促进大鼠SVZ体外培养的NSCs分化.