牛磺酸促进宫内生长受限胎鼠神经干细胞分化的研究

摘要

目的通过观察牛磺酸对宫内生长受限(IUGR)胎鼠神经干细胞(NSCs)分化的影响,探讨其脑保护机制。方法采用低蛋白饮食法建立IUGR胎鼠模型。取胎鼠室管膜下生发基质区(SVZ)脑组织进行NSCs培养。将传代培养所得NSCs分为3组:正常对照组、IUGR组和IUGR+牛磺酸组。分别对3组细胞进行诱导分化5d。采用免疫荧光法检测各组分化细胞的神经细胞特异性微管蛋白β3(βⅢ-tubulin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、髓鞘碱性蛋白(MBP)阳性细胞数,计算各种细胞所占比例;采用Westernblot法检测各组细胞βⅢ-tubulin及GFAP蛋白水平。结果1.正常对照组、IUGR及IUGR+牛磺酸组βⅢ-tubulin阳性细胞计数比例分别为(18.50±0.64)%、(15.61±0.76)%、(18.42±0.82)%,GFAP阳性细胞计数比例分别为(72.19±0.82)%、(74.87±0.67)%、(71.68±0.92)%,组间比较差异均有统计学意义(F=49.103、44.643,均P<0.01)。与正常对照组比较,IUGR组βⅢ-tubulin阳性细胞计数比例显著减少(P<0.01),GFAP阳性细胞计数比例显著增加(P<0.01);与IUGR组相比,IUGR+牛磺酸组βⅢ-tubulin阳性细胞计数比例显著增高(P<0.01),GFAP阳性细胞计数比例显著减少(P<0.01);正常对照组与IUGR+牛磺酸组二种细胞计数比例比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。2.正常对照组、IUGR及IUGR+牛磺酸组βⅢ-tubulin蛋白相对表达量分别为0.44±0.02、0.33±0.03、0.42±0.02,GFAP蛋白相对表达分别为1.13±0.02、1.50±0.04、1.21±0.01,组间比较差异均有统计学意义(F=45.191、234.525,均P<0.01)。与正常对照组相比,IUGR组βⅢ-tubulin蛋白表达显著减少(P<0.01),GFAP蛋白水平显著增高(P<0.01);与IUGR组相比,IUGR+牛磺酸组βⅢ-tubulin蛋白表达显著增高(P<0.01),GFAP蛋白水平显著减少(P<0.01);正常对照组与IUGR+牛磺酸组2种蛋白水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论牛磺酸可促进IUGR胎鼠NSCs向神经元方向分化,并保持各种分化细胞比例正常。