荧光PCR熔解曲线法在非结核分枝杆菌菌种鉴定中的应用价值

摘要

目的 探讨荧光PCR熔解曲线法对非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)菌种鉴定的价值,为临床NTM肺病的快速准确诊断提供科学依据.方法 收集西安市胸科医院2020年4-10月经BACTEC MGIT 960液体培养阳性、MPB64快速抗原检测阴性的71例疑似NTM临床分离株.每例患者临床分离株采用同一标本进行荧光PCR熔解曲线法、基因芯片法及16S rRNA基因测序法菌种鉴定.以16S rRNA基因测序结果为参考标准,评价荧光PCR熔解曲线法菌种鉴定的检测效能.结果 荧光PCR熔解曲线法检出67株NTM菌株,其中以龟/脓肿分枝杆菌(37.3％,25/67)和胞内分枝杆菌(25.3％,17/67)为主.荧光PCR熔解曲线法检测龟/脓肿分枝杆菌的敏感度、特异度和符合率分别为100.0％(24/24)、97.7％(42/43)和98.5％(66/67);检测胞内分枝杆菌的敏感度、特异度和符合率分别为94.4％(17/18)、100.0％(49/49)和98.5％(66/67).荧光PCR熔解曲线法与16S rRNA基因测序法一致率达97.0％(65/67);基因芯片法与16S rRNA基因测序法一致率为83.6％(56/67).结论 荧光PCR熔解曲线法与16S rRNA基因测序法菌种鉴定具有较高的一致性,能够用于分枝杆菌菌种的快速鉴定,具有较好的临床应用价值.