兔出血症病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及对家兔的免疫保护效果

摘要

用RT-PCR方法扩增兔出血症病毒(RHDV)衣壳蛋白VP60基因,通过克隆、转化得到重组穿梭载体Bac-mid-VP60,用此质粒转染Sf9昆虫细胞,得到重组病毒rAeV-Bac-VP60,经RT-PCR、IFA、SDS-PAGE、Westernblotting、HA和HI鉴定,结果显示重组VP60蛋白在Sf9昆虫细胞中得到表达.在不加任何佐剂的情况下,用表达的蛋白免疫3月龄非RHD免疫兔,结果显示,免疫后21天,兔体内可产生抗RHDV抗体,抗体血凝抑制效价为26～27,该抗体可以抵抗血凝效价为210致死剂量RHDV强毒的攻击,本研究为兔病毒性出血症基因工程疫苗的研制奠定了基础.