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菌落免疫学试验在筛选重组表达工程菌中的应用

         

摘要

哈兽研所科研人员以RT—PCR及重组DNA技术克隆到犬瘟热病毒(CDV)融合蛋白基因(F)后,平端插入温度敏感的表达载体PBV220的smal位点。构建重组表达质粒后,转化大肠杆菌受体菌,以Amp抗性筛选。30℃培养使菌体适量增殖后,在42℃条件下诱导外源基因在E.coli中表达并原位将待筛选的菌落转移到硝酸纤维索膜上,经溶菌酶裂解菌体

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