hBMP-2基因转染兔骨髓间充质干细胞的表达及生物学效应的观察

摘要

目的:观察人骨形态发生蛋白-2(human bone morphogenetic protein-2,hBMP-2)基因转染兔骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell s,BMSCs)后的表达及表达产物对BMSCs增殖和向成骨细胞分化的影响.方法:利用腺病毒表达载体Adeno-XTM将hBMP-2基因转染兔BMSCs,用免疫组化染色.检测细胞内BMP-2的表达.然后通过MTT法分析其对细胞增殖的影响,并分别通过体外检测Ⅰ型胶原合成和表达情况、碱性磷酸酶染色和钙结节Von Kossa染色,观察腺病毒介导hBMP-2基因转染兔BMSCs的成骨分化能力.结果:转基因细胞6周时仍能表达外源性基因.基因表达产物hBMP-2能明显促进BMSCs的增殖以及Ⅰ型胶原的合成,转染后第14天碱性磷酸酶染色多数细胞为阳性,第21天出现钙结节.结论:hBMP-2基因转染BMSCs后可获得稳定表达,且基因表达产物能促进BMSCs增殖,并诱导其向成骨细胞分化.