中国对虾部分基因组文库构建和微卫星DNA序列的筛选

摘要

以中国对虾为实验材料,提取肌肉的基因组DNA.经Bsp143Ⅰ酶切后,回收500～1000bp的DNA片段,与经BamHⅠ酶切并去磷酸化的PUC19重组,将重组载体转入大肠杆菌DH5α中.然后将其涂布于含氨苄青霉素的LB平板上,过夜培养后,经蓝白斑筛选,构建对虾部分基因组文库.采用载体质粒的通用引物进行PCR检测插入片段的大小,对基因组文库进一步进行筛选.从建立的文库中选取100个片段大小合适的克隆进行测序,其中54个克隆的DNA插入片段含有微卫星序列,共获得了111个微卫星序列,在GenBank中注册了12个微卫星序列.本实验中还发现1个含有23bp的小卫星序列.