UBE2T调控三阴性乳腺癌增殖、迁移和侵袭等生物学行为的实验研究

摘要

目的 探讨UBE2T对三阴性乳腺癌恶性生物学行为的影响并探讨可能作用机制.方法 采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测三阴性乳腺癌组织和正常乳腺组织中UBE2T mRNA表达水平.采用GEPIA和Kaplan Meier?plotter在线分析乳腺癌组织和正常乳腺组织中UBE2T表达差异以及UBE2T表达与乳腺癌预后的关系.采用UBE2T shRNA质粒和PC?MV?UBE2T质粒转染MDA?MB?231细胞来下调和上调UBE2T表达,采用Western blotting检测验证转染效率.采用CCK?8法、流式细胞术和Transwell小室检测不同UBE2T表达对MDA?MB?231细胞增殖、周期变化、迁移和侵袭的影响.采用Western blotting检测AKT和ERK信号通路蛋白表达.结果 三阴性乳腺癌和正常乳腺组织中UBE2T mRNA表达量分别为6.82±1.77和2.12±1.40(P<0.01).GEPIA和Kaplan Meier?plotter在线分析结果显示乳腺癌中UBE2T高表达,且高表达者OS、RFS较低表达者差,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,上调UBE2T表达后细胞增殖率升高,下调UBE2T表达后细胞增殖率降低,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,PCMV?UBE2T组G1期细胞比率增加,S期细胞比率降低,差异具有统计学意义(P<0.05).Transwell实验结果显示,sh?UBE2T组迁移和侵袭细胞数分别为266±19、227±14,低于对照组的528±38、406±21,差异具有统计学意义(P<0.05).Western blotting结果显示,PCMV?UBE2T组p?AKT和p?ERK1/2表达水平分别为1.69±0.14、2.10±0.15,高于对照组(P<0.05).sh?UBE2T组p?AKT和p?ERK1/2表达水平分别为0.59±0.07、0.35±0.07,低于对照组(P<0.05).结论 UBE2T在乳腺癌组织中高表达,通过ERK和AKT信号途径影响乳腺癌细胞恶性生物学行为.