不同引物标记物在显色法芯片检测结核分支杆菌利福平和异烟肼耐药基因中应用比较

摘要

目的 比较不同标记物在显色法芯片检测结核分支杆菌利福平和异烟肼耐药基因中的影响.方法 分别采用地高辛、荧光素和生物素标记引物,建立地高辛-抗地高辛、荧光素-抗荧光素和生物素-亲和素酶呈色法芯片检测结核分支杆菌利福平(RFP)和异烟肼(INH)耐药基因方法,同时用3种方法检测46株结核分支杆菌临床分离株、19种非结核分支杆菌标准株、9种非分支杆菌标准株和结核分支杆菌H37Rv标准株,并对3种方法的敏感性和重复性进行比较.结果 经3种方法平行检测,46例结核分支杆菌临床分离株结果完全一致;19种非结核分支杆菌标准株、9种非分支杆菌标准株结果均为阴性,结核分支杆菌H37Rv标准株结果均为野生型;地高辛系统和荧光素系统敏感度为2.0×103拷贝/ml,生物素-亲和素系统敏感度为2.0 ×104拷贝/ml;3种方法均有良好的重复性.结论 3种方法均具有良好的重复性和特异性,生物素系统敏感度略低于地高辛系统和荧光素系统.