健脾益气摄血方对模型小鼠血小板减少性紫癜的改善作用

摘要

目的探讨健脾益气摄血方对模型小鼠血小板减少性紫癜(ITP)的改善作用。方法将60只BALB/c小鼠随机分为空白对照组(等体积生理盐水)、模型组(等体积生理盐水)、醋酸泼尼松组(5 mg/kg)及健脾益气摄血方低、中、高剂量组(6.96,13.91,27.82 g/kg),各10只。除空白对照组外,其余各组均采用豚鼠抗小鼠血小板血清腹腔注射,以复制小鼠ITP模型。建模成功后,各组小鼠均灌胃给予相应药物或生理盐水,每日1次,连续14 d。各组小鼠给药后7,14 d时取眼眶静脉血,检测外周血血小板计数;苏木素-伊红(HE)染色,光镜下观察小鼠脾脏及肾脏组织病理形态学;采用流式细胞仪检测小鼠脾脏中辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)比例;小鼠眼球取血,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠血清中白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素6(IL-6)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))及白细胞介素10(IL-10)水平;采用实时定量聚合酶链反应法及Westernblot法分别检测脾脏组织中叉头样转录因子3(Foxp3)及孤独核受体(RORγt)mRNA和蛋白的表达水平。结果与模型组比较,各用药组小鼠外周血血小板计数均明显增多;光镜下脾脏中异常骨髓巨核细胞数量不同程度减少,且脾脏Th17细胞明显减少,Treg细胞明显增多;血清IL-10水平明显降低,IL-17,IL-6,TGF-β_(1)水平均明显升高;脾脏组织中RORγt mRNA及蛋白表达水平均显著降低,Foxp3 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论健脾益气摄血方对模型小鼠ITP有明显改善作用,其作用机制可能与调节Th17/Treg细胞免疫失衡有关。