地高辛对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡作用的研究

摘要

目的探讨地高辛对体外培养的三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡的影响,并揭示其发生的可能机制。方法体外培养乳腺癌MDA-MB-231细胞,分为对照组和给药组(25、50、100、200 nmol/L地高辛)。CCK-8法检测不同浓度的地高辛、不同作用时间(24、48、72 h)对MDA-MB-231细胞活力的影响。流式细胞术定量考察不同浓度的地高辛对细胞凋亡的作用及对线粒体膜电位的影响。Western blot检测MDA-MB-231细胞中Bax、Bcl-2和P62、LC3B蛋白的表达情况。透射电镜观察不同浓度的地高辛对MDA-MB-231细胞自噬体产生的影响。结果CCK-8结果提示,与对照组比较,在不同时间点,给药组使MDA-MB-231细胞活力降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。Annexin V/PI双染结果提示,与对照组比较,给药组使细胞凋亡率增加,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。JC-1染色结果提示,与对照组比较,50、100、200 nmol/L地高辛使MDA-MB-231细胞线粒体膜电位电位降低,JC-1所占比例减少,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。透视射电镜结果提示,与对照组比较,给药组细胞形态发生凋亡样改变,给药组可见自噬体的形成。Western blot结果提示,与对照组比较,给药组上调促凋亡因子Bax,下调抗凋亡因子Bcl-2的表达,并上调自噬标志性蛋白LC3B表达,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,50、100、200 nmol/L地高辛使P62表达下降,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论地高辛抑制MDA-MB-321细胞的活力,促进凋亡,诱导自噬的发生,可能对三阴性乳腺癌有潜在作用。