RNAi沉默Plk1对胰腺癌细胞系AsPC-1侵袭转移的影响

摘要

目的 探讨RNAi沉默Plk1基因表达与胰腺癌细胞侵袭转移能力的关系.方法 根据Plk1基因特点,设计并用化学方法合成了4个小干扰核糖核酸分子(siRNA) (shplk 1-1、shplk 1-2、shplk1-3、shplk1-4),脂质体转染法将短链siRNA转入AsPC-1细胞;细胞分为:未处理组为对照组、空质粒组、shplk1-1组、shplk1-2组、shplk1-3组、shplk1-4组.采用RT-PCR和Western blot法检测siRNA对Plk1表达的抑制效果;采用Transwell法检测转染后细胞侵袭能力;采用划痕实验检测转然后细胞迁移能力.结果 RT-PCR和Western blot结果示所设计的4个siRNA均能明显抑制AsPC-1细胞Plk1 mRNA水平,以shplk1-3效果最好,与对照组、空质粒组及其他三组比较,转染shplk1-3组Hk1 mRNA和蛋白的表达水平显著降低(P＜0.01);以转染shplk1-3处理AsPC-1细胞后与对照组、空质粒组比较,Transwell侵袭实验证实:细胞转染24 h后,正常对照组、空质粒组和shplk1-3组穿过人工基底膜的侵袭细胞数分别为(195±16)、(176±13)、(83±5)个,侵袭能力明显降低,差异有高度统计学意义(P＜0.01);细胞划痕实验证实:shplk 1-3组迁移能力明显降低.结论 抑制胰腺癌细胞Plk1基因,侵袭迁移能力明显降低,能够为胰腺癌的治疗提供新的策略.