RNA干扰阻断CXCR4基因对胰腺癌AsPC-1细胞侵袭转移的影响

摘要

目的:观察针对CXCR4基因慢病毒Lentiviral(LV)介导的RNAi转染胰腺癌细胞株As PC-1后细胞增殖、迁移、侵袭的影响,探讨可能机制.方法:人CXCR4基因干扰靶点设计后成功转染人胰腺癌细胞系As PC-1细胞,然后分为转染组(LV-si CXCR4-1)、阴性对照组(As PC-1-LV-con)和空白对照组(AsP C-1细胞),实验组加入基质细胞衍生因子-1α(stromal cell-derived factor-1α,SDF-1α),MTT法检测细胞增殖,迁移实验检测细胞迁移,Transwell检测细胞的体外侵袭,Western blot检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质蛋白金属酶(matrix metalloproteinases,MMP)2和MMP9的表达.结果:在SFM或10%NCS培养条件下,SDF-1α均可刺激As PC-1细胞、As PC-1-LV-Con细胞增殖(P<0.01),对LV-si CXCR4-1增殖均无明显促进作用;SDF-1α可促进As PC-1、As PC-1-LV-C o n细胞迁移和侵袭(P<0.01),对LVsi CXCR4-1无明显促进作用;在SDF-1α作用下,LV-si CXCR4-1细胞的MMP9及VEGF的蛋白表达低于As PC-1、As PC-1-LV-Con细胞(P<0.01).结论:CXCR4基因RNAi可显著抑制SDF-1α引起的As PC-1细胞的增殖、体外迁移和侵袭,进一步证实SDF-1/CXCR4受体配体系统参与了胰腺癌的增殖、侵袭及转移,通过RNAi技术可抑制胰腺癌细胞的增殖、侵袭及转移.