人源性单纯疱疹病毒II型抗gD蛋白噬菌体单链抗体库的构建

摘要

目的: 利用HSV-2病毒IgG、IgM抗体阳性的生殖器疱疹患者外周血淋巴细胞,构建人源单链抗体库.方法: 取患者外周血淋巴细胞提取总RNA,逆转录成cDNA,以其为模板,分别扩增抗体重链及轻链可变区基因,将重链、轻链可变区基因拼接成单链抗体(scFv)基因,酶切后连接到噬菌粒载体pFAB5c中,将重组噬菌粒载体电转化大肠杆菌XL-1 Blue,构建噬菌体抗体库并测定其库容量.结果:成功构建人源性单纯疱疹病毒抗gD蛋白噬菌体抗体库,库容达1.86×106.结论: 利用RT-PCR和噬菌体表面展示技术成功构建了HSV-2抗gD蛋白人源性单链抗体库,为其进一步的研究打下了基础.