酶联免疫法检测乳与乳制品中的氟喹诺酮类药物

摘要

研究酶联免疫法检测乳及乳制品中氟喹诺酮类药物的残留,氟喹诺酮EIA微孔板含12个板条,每个板条8孔,用羊抗兔抗体IgG包被.特异性抗体(兔多克隆抗喹诺酮类抗体)、辣根过氧化物酶标记的诺氟沙星(酶结合物)、诺氟沙星标准品或样品被加入到微孔后,经过1小时孵育,特异性抗体被牢固地结合在板条上的羊抗兔抗体IgG上,与此同时,游离的氟喹诺酮类(存在于标准品溶液或样品中)和酶结合物相互竞争与特异性抗体的结合位点结合(即竞争性酶联免疫检测).然后在洗涤过程中除去未结合的酶结合物试剂,加入色原底物(四甲基联苯胺TMB),结合的酶结合物将无色的底物转化为蓝色的产物.滴加终止液终止显色反应,颜色由蓝色变为黄色,在450nm波长下检测吸光度,吸光度值与样品中氟喹诺酮类浓度成反比.本方法单样检测时间为120分钟,具有简便、快速、灵敏等特点,适用于乳与乳制品中氟喹诺酮类残留的检测,该方法为半定量检测检测结果超出相应产品的质量标准,必要时,需用国家标准中规定的仲裁方法或仪器法进行验证.