酶联免疫法检测家禽组织中氯霉素残留的探讨

摘要

氯霉素(chloramphenicol，CAP)是一种抗菌谱较广、抗菌作用强的抗生素，由于该药物的毒副作用较大，且易残留在肉质和蛋、奶食品中，对人体安全造成危害，已禁止使用。为了从根本上控制动物性食品中氯霉素残留，保障人民的健康及扩大食品的贸易往来，除了从源头上建立使用一套完善的监控、管理体系外，建立灵敏度高，特异性强，简便易行的动物性食品中氯霉素残留的检测方法是非常必要的。 本研究采用液相色谱法、液相色谱-质谱法(Liquid Chromat rography -Mass Spectromet ry，简称LC-MS法)与酶联免疫ELISA方法进行氯霉素残留检测比较，结果表明，液相色谱-质谱法的检出限为：0.5μg/kg(S/N=6.33)～2μg/kg (S/N=8.08)，液相色谱法的检出限为1μg/kg(S/N=10.88)～4μg/kg(S/N=18.07)，酶联免疫ELISA方法最低检测限为100ng/Kg。从数据表明液相色谱-质谱法具有灵敏度高、检出限低的优点。但是结合生产实际，酶联免疫ELISA方法在基层机构使用更方便，因此可以采用酶联免疫ELISA方法进行样品的初筛，再对阳性样品进行液相色谱-质谱法确证。 为此采用酶联免疫法ELISA(Enzyme-linkde Immono Sorbent Assay)方法，结合RANDOX公司试剂盒对基层中30份禽类组织样品进行检测。实验结果表明，该方法的最低检测限为100ng/Kg，能达到目前国际上氯霉素残留测定低限的要求，并有继续提高检测灵敏度的潜力。批内变异系数为3.54％～12.88％，批间变异系数为6.79％～17.88％，当向样品中分别添加0.1、0.5、1.00、4.00ug/L 4个浓度水平的氯霉素，采用乙腈水提取法时，平均回收率为76％～106.5％。该方法灵敏度高，重复性较好，适用于家禽组织中氯霉素残留的筛选。酶联免疫法作为一种快速筛选手段，在现场监控和基层检测中有着广阔的推广应用前景。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

声明

前言

1．氯霉素的生物学特性

1．1氯霉素的化学结构

1．2氯霉素的理化特性

1．3氯霉素的作用

1．4氯霉素的抗菌作用机理

1．5氯霉素的体内代谢过程

1．6氯霉素的构效关系

1．7氯霉素的毒性

2．氯霉素的残留

2．1氯霉素在动物组织及动物性产品中残留状况

2．2氯霉素残留及消除规律

2．3氯霉素残留的危害

2．4国内外关于氯霉素残留的规定

3．氯霉素残留的检测

3．1氯霉素残留的检测方法

3．2氯霉素残留的检测中存在的问题

4．研究的目的与意义

第一章氯霉素残留检测方法的研究

1材料与方法

1．1材料

1．2实验方法

2．结果与分析

2．1 LC法条件优化及检测结果

2．2 LC-MS法检测结果

2．3 ELISA法检测结果

3．讨论

3．1关于LC法检测氯霉素残留

3．2关于LC-MC法检测氯霉素残留

3．3关于ELISA法检测氯霉素残留

3．4三种方法检测氯霉素残留的比较

第二章酶联免疫吸附法在检测家禽组织中氯霉素残留的应用

1材料与方法

1．1材料

1．2方法

2结果与分析

2．1标准曲线绘制

2．2检验的回收率

2．3检验的精密度

2．4检验的灵敏度

2．5标准曲线的重复性

2．6试剂盒的稳定性

2．7鸡、鸭、鹅肌肉组织中氯霉素残留的检测结果

3．讨论

3．1样品前处理方法的选择问题

3．2试剂盒的检出限问题

3．3实验操作中应注意的问题

3．4检测氯霉素的酶联试剂盒比较

3．5检测结果的判定问题

结论

参考文献

致谢

作者简历