高效液相色谱法快速测定鱼类鲜度指标K值及方法学优化

摘要

对行业标准SC/T3048-2014测定鱼类鲜度K值(三磷酸腺苷,二磷酸腺苷,腺苷酸,肌苷酸,肌苷和次黄嘌呤)的分析方法进行优化。优化后的条件:以高氯酸溶液为提取剂,样品经高速均质结合超声波辅助提取后,用氢氧化钠溶液调节pH至6.0~6.4,一级水定容。采用C_(4)柱(4.6mm×250mm,5μm)分离,以磷酸二氢钾溶液(0.048mol/L,pH=5.7)~甲醇/磷酸二氢钾溶液(9/1,v/v)为流动相进行梯度洗脱,检测波长254nm,流速1.0mL/min,柱温30℃,外标法定量。优化结果表明:6种化合物的分析时间由行业标准方法的38min减少至11min。该方法的加标回收率(77.2%~112%),相对标准偏差(4.69%~7.81%),检出限(0.648~2.15mg/kg)和定量限(2.16~7.18mg/kg)均优于行业标准方法。结果表明该方法操作简便,分析快速,干扰较小,灵敏度高和重现性好,具有一定的实用价值。