手性柱高效液相色谱拆分测定营养强化剂硒-甲基硒代半胱氨酸对映体

摘要

目的:建立营养强化剂硒-甲基硒代半胱氨酸对映体拆分与定量测定高效液相色谱法,为其质量标准的建立奠定基础.方法:采用配体交换手性柱,以硫酸铜为手性配体流动相,考察了铜离子浓度、D,L-硒-甲基硒代半胱氨酸进样量和柱温等因素对硒-甲基硒代半胱氨酸对映体的拆分效果.结果:优化拆分条件为:检测波长240nm,柱温为35℃,流动相硫酸铜浓度为0.4mmol/L,流速为1.0mL/min.在上述色谱条件下,L-硒-甲基硒代半胱氨酸的进样量在0.95 μg～30.28μg范围内与峰面积之间呈现良好线性关系,线性回归方程为Y =725.52X-62.13,R=0.9999,加标回收率为97.67％ ～99.88％,检测限和定量限分别为0.0528μg和0.132μg.归一化法测得该色谱条件下能准确检出0.6％以上的D型异构体.结论:该方法专属性强,灵敏度较高,重现性好,结果准确,适用于L-硒-甲基硒代半胱氨酸的工艺和质量控制.