羊口疮病毒B2L基因密码子优化及截短表达

摘要

B2L蛋白是羊口疮病毒(ORFV)的结构蛋白,也是病毒的保护性抗原,可以刺激机体产生强烈的抗病毒反应.为表达出高可溶性的B2L蛋白并检测其免疫原性,将羊口疮病毒B2L基因进行密码子偏爱性优化设计,并截取抗原性高、疏水性好的区域,构建了His-tag融合可溶性标签的表达重组载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态中,经IPTG诱导,利用SDS-PAGE电泳对融合蛋白的可溶性表达进行检测,筛选出高可溶性表达的His融合蛋白.重组蛋白通过Ni-NTA agarose亲和纯化后,进行Western-blot验证.结果显示,经过SDS-PAGE和Western-blot鉴定的目的条带分子质量与预期大小相符.本试验成功在上清中表达和纯化出B2L基因编码蛋白.