耐消化道逆环境双歧杆菌优良菌株的筛选

摘要

筛选耐消化道逆环境的优良双歧杆菌菌株,以来源于母乳婴儿粪便、未断奶仔猪粪便、市售双歧杆菌制剂和本实验室保存的双歧杆菌为出发菌株,采用改良MRS液体培养基,模拟人体胃肠道逆环境,对其耐消化道逆环境特性进行了研究。通过耐酸(pH3的PBS)、耐胆汁酸盐(质量浓度1～2 0mg/mL)试验对初筛得到的14株菌株进行复筛,得6株菌株,它们在pH3条件下作用12 0min后存活率均>93% ,活菌数均>10 8cfu/mL ;在含5mg/mL牛胆酸钠的改良MRS液体培养基中作用2 4h后活菌数仍>10 6cfu/mL ,除J12和B0 3外,其他4株在含2 0mg/mL牛胆酸钠的改良MRS液体培养基中作用2 4h仍有活菌被检出(活菌数>10 4cfu/mL)。在此基础上,采用胃蛋白酶和胰蛋白酶模拟胃肠液得3株耐消化道酶菌株A0 3、A0 4和L 1,在含5mg/mL胃蛋白酶的PBS培养基(pH3)作用12 0min后其活菌数均高达约10 8cfu/mL ,而在含10mg/mL胰蛋白酶的改良MRS液体培养基作用2 4h后,其活菌数均高达约10 9cfu/mL ;这2种消化道酶对其几乎没有抑制作用。研究结果表明,双歧杆菌A0 3、A0 4和L 1菌株耐受消化道逆环境的能力最好,可用做微生态制剂菌株。