粮食中主要霉菌实时荧光PCR检测方法建立

摘要

建立TaqMan?实时荧光PCR快速检测粮食霉变主要霉菌的方法.根据引发粮食霉变的霉菌属5.8S rD-NA的ITS序列来设计通用引物和探针,一次实时荧光PCR扩增同时检测黄曲霉和寄生曲霉,与SN/T 2582—2010中普通PCR方法进行比较,验证方法的特异性和灵敏度;通过建立粮食霉变模型并进行霉菌检测,进一步验证方法的准确性.结果表明,所设计的实时荧光PCR引物探针具有良好的特异性和灵敏性,灵敏度达到10-2 ng/μl.所建立的实时荧光PCR快速检测粮食主要霉菌的方法,快速简便准确,适用于引发粮食霉变的黄曲霉和寄生曲霉的检测.