槲皮素对异烟肼诱导肝细胞毒性的保护作用及其机制

摘要

目的:探讨活性氧(ROS)介导的线粒体氧化损伤在异烟肼(INH)诱导肝细胞毒性中的作用及槲皮素对INH肝细胞毒性的保护效应及机制.方法:将L-02细胞随机分为5组:异烟肼组(10 mmol/L INH)、槲皮素处理组(10 mmol/L INH和50μmol/L槲皮素)、谷胱甘肽(GSH)预处理组(20 mg/mL GSH、10 mmol/L INH和50μmol/L槲皮素)、谷胱甘肽组(20 mg/mL GSH)、对照组(等体积的无血清培养基),作用24 h后,采用差速离心法制备细胞线粒体,荧光探针DCFH-DA和Rho-123检测细胞线粒体ROS水平及膜电位;TBA比色法测定丙二醛(MDA)含量;DPNH比色法测定蛋白质羰基含量;ELISA法检测8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷(8-OHdG)含量.结果:与对照组相比,INH处理细胞后细胞线粒体ROS水平升高(P<0.01),膜电位降低(P<0.01).与异烟肼组相比,槲皮素处理组细胞线粒体ROS水平降低(P<0.01),膜电位升高(P<0.05);谷胱甘肽预处理组细胞线粒体ROS水平低于槲皮素处理组(P<0.05),线粒体膜电位高于槲皮素处理组(P<0.05).与对照组相比,细胞经INH处理后MDA、蛋白质羰基及8-OhdG的含量增加(P<0.01).与异烟肼组比较,应用槲皮素后可使MDA、蛋白羰基、8-OHdG的含量减少(P<0.01);谷胱甘肽预处理组MDA、蛋白羰基、8-OHdG含量低于槲皮素处理组(P<0.05).结论:在本实验条件下,INH可诱导L-02细胞线粒体氧化损伤,且ROS参与了此过程;槲皮素对INH诱导的线粒体氧化损伤具有保护效应,其机制可能与其抑制ROS水平有关.