小鼠淋巴瘤L5178Y细胞tk基因自发分子突变研究

摘要

背景与目的:研究小鼠淋巴瘤L5178Y3.2.7c-tk+/-细胞tk基因的自发突变频率和分子突变。材料与方法:进行4次平行试验,计算自发突变频率。选择tk基因自发突变子(tk-/-),提取基因组DNA,经等位基因特异性PCR扩增,杂合性缺失(Lossofheterozygosity,LOH)分析和测序等技术,分析其分子突变谱。结果:L5178Y细胞tk基因的平均自发突变频率为145×10-6,tk基因自发突变LOH平均发生率为79.8%。由LOH分析的试验结果显示,自发突变的LOH在大集落(Largeclone,LC)与小集落(Smallclone,SC)之间差异无统计学意义。序列分析证实,自发tk基因点突变主要为碱基置换。结论:tk基因的自发突变是以功能性等位基因缺失为主的分子突变,其中点突变以碱基置换为主。